在生命科学研究中，肽分子的构象状态直接影响其功能发挥，尤其是在信号转导、免疫识别和药物设计等关键过程中。肽的二级结构（如α-螺旋、β-折叠、无规卷曲）不仅决定其空间构型，也在分子互作中扮演着核心角色。圆二色谱（Circular Dichroism, CD）作为一种快速、灵敏的构象分析技术，在肽二级结构研究中占据了重要地位。

一、什么是圆二色谱（CD）？

圆二色谱是一种基于手性分子对左右圆偏振光吸收差异的光谱技术，能够在紫外区域（通常为190–260 nm）提供关于分子构象的信息。CD技术特别适用于小分子肽和蛋白质等生物大分子的二级结构表征，具有操作简便、样本用量少、无需标记等优势。

二、CD在肽二级结构分析中的原理

CD谱图的形状与肽链的二级结构密切相关，不同构象在远紫外区呈现出独特的信号特征：

• α-螺旋结构：在208 nm 和 222 nm 处通常表现为双负峰，在190 nm 附近有一个正峰；
• β-折叠结构：表现为195–200 nm 附近的负峰和215–218 nm 附近的正峰；
• 无规卷曲结构：通常表现为198 nm 附近的强负峰，无明显正峰。

通过对CD谱图的解析，可以定量估算肽分子中各二级结构的比例，从而推测其空间构型变化和稳定性特征。

三、应用场景与优势

CD在肽结构研究中的适用场景非常广泛：

1、肽药物的结构验证

在肽药物开发过程中，CD可用于验证合成肽是否正确折叠为目标构象，确保其在体内具有预期的生物活性。

2、结构稳定性研究

CD可实时监测温度、pH或有机溶剂对肽构象的影响，评估其在复杂环境中的稳定性。

3、肽-蛋白相互作用研究

当肽与蛋白结合后其二级结构发生改变时，CD可以快速捕捉到这些构象差异，为后续功能验证和机制研究提供依据。

4、多肽材料与自组装体系

在生物材料和纳米结构设计中，CD是监测肽自组装过程的重要手段，尤其适用于观察α-螺旋到β-折叠等构象转变。

四、技术局限与优化建议

尽管CD在肽构象分析中用途广泛，但其也存在一定局限性：

• 分辨率有限：CD无法提供原子级结构信息，适合与核磁共振（NMR）或冷冻电镜（Cryo-EM）等技术联合使用；
• 谱图解读依赖算法：CD数据的解析需依赖经验模型或拟合算法，不同软件的拟合精度存在差异；
• 样本条件要求高：缓冲液成分需避免吸收背景干扰，如避免使用高浓度Tris或DTT。

为提高数据质量，推荐采用高纯度合成肽，并优化缓冲体系（如磷酸盐或低浓度NaF缓冲液），确保谱图信噪比充足。

圆二色谱作为探索肽二级结构的高效工具，已成为现代结构生物学不可或缺的组成部分。在科研不断深入的今天，如何快速、准确地获得肽的构象信息，是推动分子机制研究和药物开发的关键一步。百泰派克生物科技构建了完整的肽构象研究平台，支持从合成纯化、CD谱图采集到结构分析的全流程服务。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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